ऋणात्मक अभिरंजन: Difference between revisions
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[[माइक्रोस्कोपी]] में, | [[माइक्रोस्कोपी|सूक्ष्मदर्शिकी]] में, '''ऋणात्मक अभिरंजन''' एक प्रमाणित विधि है जिसका उपयोग प्रायः निदानसूचक सूक्ष्मदर्शिकी में किया जाता है [[ प्रकाशिकी |प्रकाशिकी]] अपारदर्शी द्रव के साथ एक पतले प्रतिदर्श के विपरीत इसको तकनीक वातावरण मे अभिरंजित किया जाता है वास्तविक प्रतिदर्श को अप्रभावित रूप मे छोड़ दिया जाता है और इस प्रकार दिखाई देता है कि यह धनात्मक अभिरंजन के विपरीत है जिसमें वास्तविक प्रतिरूप अभिरंजित है। | ||
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दीप्त क्षेत्र [[माइक्रोस्कोपी|सूक्ष्मदर्शिकी]] के लिए ऋणात्मक अभिरंजन सामान्यतः एक काली स्याही तरल पदार्थ जैसे [[निग्रोसिन]] और भारतीय स्याही का उपयोग करके किया जाता है। एक प्रतिदर्श जैसे कांच की परत पर प्रसारित तरल [[जीवाणु|जीवाणु संवर्ध]] को ऋणात्मक अभिरंजन के साथ मिश्रित किया जाता है और सूखने दिया जाता है जब सूक्ष्मदर्शी से देखा जाता है तो जीवाणु कोशिकाएं और लगभग उनके [[बीजाणु]], अंधेरे के आसपास के वातावरण के विपरीत प्रकाश मे दिखाई देते हैं ऋणात्मक अभिरंजन देने के लिए एक साधारण जलरोधक पेन का उपयोग करके वैकल्पिक विधि को विकसित किया गया है।<ref>{{cite journal | last1=Woeste | first1=S | last2=Demchick | first2=P | title=नकारात्मक दाग का नया संस्करण।| journal=Applied and Environmental Microbiology | publisher=American Society for Microbiology | volume=57 | issue=6 | year=1991 | issn=0099-2240 | pmid=1714705 | pmc=183484 | doi=10.1128/aem.57.6.1858-1859.1991 | pages=1858–1859}}</ref> | |||
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संचरण [[इलेक्ट्रॉन]] सूक्ष्मदर्शिकी की स्थिति में इलेक्ट्रॉनों की अपारदर्शिता परमाणु संख्या, अर्थात प्रोटॉन की संख्या से संबंधित है कुछ उपयुक्त ऋणात्मक अभिरंजनों में [[अमोनियम मोलिब्डेट]], [[यूरेनिल एसीटेट]], [[यूरेनिल फॉर्मेट]], [[फॉस्फोटुंगस्टिक एसिड|फॉस्फोटुंगस्टिक अम्ल]], [[आज़मियम टेट्रोक्साइड]], ऑस्मियम फेरिकैनाइड और ऑरोग्लुकोथियोनेट सम्मिलित हैं।<ref>{{cite book| title = चिकनी पेशी में सार्कोप्लाज्मिक रेटिकुलम की भूमिका| author = D. Chadwick| publisher = John Wiley and Sons| year = 2002| isbn = 0-470-84479-5| pages = [https://archive.org/details/roleofsarcoplasm0000unse/page/259 259–264]| url-access = registration| url = https://archive.org/details/roleofsarcoplasm0000unse/page/259}}</ref> इन्हें इसलिए चुना गया है क्योंकि ये इलेक्ट्रॉनों को दृढ़ता से प्रसारित करते हैं और जैविक पदार्थों को भी अच्छी तरह से अवशोषित करते हैं जो संरचनाएं ऋणात्मक रूप से अभिरंजित हो सकती हैं वे प्रकाश सूक्ष्मदर्शी से अध्ययन किए गए संरचनाओं की तुलना में अपेक्षाकृत बहुत छोटी हैं इस विधि का उपयोग जीवाणु, किटाणु, जीवाण्विक [[कशाभिका]], [[जैविक झिल्ली]] संरचनाओं और [[प्रोटीन]] या प्रोटीन संरचना को देखने के लिए किया जाता है जिनमें सभी की इलेक्ट्रॉन-प्रकीर्णन सामर्थ्य कम होती है। कुछ अभिरंजन, जैसे ऑस्मियम टेट्रोक्साइड और ऑस्मियम फेरिकैनाइड रासायनिक रूप से बहुत सक्रिय होते हैं ऑक्सीडेंट के रूप में वे सामान्यतः असंतृप्त कार्बन-कार्बन बन्ध के साथ प्रतिक्रिया करके वसा को तिर्यक बंध करते हैं और इस प्रकार दोनों ऊतक के प्रतिदर्शों में जैविक झिल्ली को ठीक करते हैं और साथ ही उन्हें अभिरंजन देते हैं।<ref name="Bozzola">{{cite book|isbn = 978-0-7637-0192-5|chapter = Specimen Preparation for Transmission Electron Microscopy|pages = 21–31|chapter-url = https://books.google.com/books?id=RqSMzR-IXk0C&pg=PA21|first = John J.|last = Bozzola|author2=Russell, Lonnie D.| year = 1999|publisher = Jones and Bartlett|location = Sudbury, Mass.|title = Electron microscopy : principles and techniques for biologists}}</ref><ref>{{cite book| pages = 45–61| url = https://books.google.com/books?id=nfsVMH8it1kC| title = Principles and techniques of electron microscopy: biological applications| author = M. A. Hayat | |||
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[[इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी|इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी]] में ऋणात्मक अभिरंजन का चयन बहुत महत्वपूर्ण हो सकता है। एक रोगग्रस्त पौधे से ऋणात्मक रूप से अभिरंजन वाले पत्तों के सर्पण का उपयोग करने वाले पादप विषाणुओं के प्रारंभिक अध्ययन में एक अभिरंजन के साथ केवल वृत्तीय विषाणु और दूसरे के साथ केवल छड़ के आकार के विषाणु दिखाई देते है सत्यापित निष्कर्ष यह था कि यह पौधा दो अलग-अलग विषाणुओं के मिश्रित [[संक्रमण]] से पीड़ित था जब तक अधिक सुरक्षा सावधानियों का अनुसरण नहीं किया जाता है तब तक प्रकाश सूक्ष्मदर्शी और इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी दोनों स्तरों पर ऋणात्मक अभिरंजन कभी भी संक्रामक जीवों के साथ नहीं किया जाना चाहिए और ऋणात्मक अभिरंजन सामान्यतः एक बहुत ही कम तैयारी की विधि है इस प्रकार यह संक्रमण की संभावना को कम नहीं करता है।[[File:HexLamMic phases.jpg|thumb|right|225x225px|ऋणात्मक अभिरंजन द्वारा [[ परतदार |परतदार]] (एलई), व्युत्क्रमित-माइकेलर (एम) और व्युत्क्रमित [[हेक्सागोनल|षट्कोणीय]] एच-II सिलिंडर (एच) मे [[लिपिड|वसा]] चरणों की पहचान।]] | |||
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[[ | ऋणात्मक अभिरंजन संचरण इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी को लैमेलर [[ लाइपोसोम |लिपोसोम्स]] (एलई), व्युत्क्रमित वृत्तीय मिसेलस (एम) और व्युत्क्रमित षट्कोणीय (एच-II) बेलनाकार (एच) चरणों (चित्र देखें) को जलीय वसा की संरचना के अध्ययन और पहचान के लिए सफलतापूर्वक नियोजित किया गया है।<ref>{{cite journal | last=Yashroy | first=R. C. | title=नकारात्मक धुंधला इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा लैमेलर फैलाव और क्लोरोप्लास्ट झिल्ली लिपिड का चरण पृथक्करण| journal=Journal of Biosciences | publisher=Springer Science and Business Media LLC | volume=15 | issue=2 | year=1990 | issn=0250-5991 | doi=10.1007/bf02703373 | pages=93–98| s2cid=39712301 }}</ref> | ||
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Latest revision as of 18:33, 20 April 2023
सूक्ष्मदर्शिकी में, ऋणात्मक अभिरंजन एक प्रमाणित विधि है जिसका उपयोग प्रायः निदानसूचक सूक्ष्मदर्शिकी में किया जाता है प्रकाशिकी अपारदर्शी द्रव के साथ एक पतले प्रतिदर्श के विपरीत इसको तकनीक वातावरण मे अभिरंजित किया जाता है वास्तविक प्रतिदर्श को अप्रभावित रूप मे छोड़ दिया जाता है और इस प्रकार दिखाई देता है कि यह धनात्मक अभिरंजन के विपरीत है जिसमें वास्तविक प्रतिरूप अभिरंजित है।
दीप्त क्षेत्र सूक्ष्मदर्शिकी
दीप्त क्षेत्र सूक्ष्मदर्शिकी के लिए ऋणात्मक अभिरंजन सामान्यतः एक काली स्याही तरल पदार्थ जैसे निग्रोसिन और भारतीय स्याही का उपयोग करके किया जाता है। एक प्रतिदर्श जैसे कांच की परत पर प्रसारित तरल जीवाणु संवर्ध को ऋणात्मक अभिरंजन के साथ मिश्रित किया जाता है और सूखने दिया जाता है जब सूक्ष्मदर्शी से देखा जाता है तो जीवाणु कोशिकाएं और लगभग उनके बीजाणु, अंधेरे के आसपास के वातावरण के विपरीत प्रकाश मे दिखाई देते हैं ऋणात्मक अभिरंजन देने के लिए एक साधारण जलरोधक पेन का उपयोग करके वैकल्पिक विधि को विकसित किया गया है।[1]
संचरण इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी
संचरण इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी की स्थिति में इलेक्ट्रॉनों की अपारदर्शिता परमाणु संख्या, अर्थात प्रोटॉन की संख्या से संबंधित है कुछ उपयुक्त ऋणात्मक अभिरंजनों में अमोनियम मोलिब्डेट, यूरेनिल एसीटेट, यूरेनिल फॉर्मेट, फॉस्फोटुंगस्टिक अम्ल, आज़मियम टेट्रोक्साइड, ऑस्मियम फेरिकैनाइड और ऑरोग्लुकोथियोनेट सम्मिलित हैं।[2] इन्हें इसलिए चुना गया है क्योंकि ये इलेक्ट्रॉनों को दृढ़ता से प्रसारित करते हैं और जैविक पदार्थों को भी अच्छी तरह से अवशोषित करते हैं जो संरचनाएं ऋणात्मक रूप से अभिरंजित हो सकती हैं वे प्रकाश सूक्ष्मदर्शी से अध्ययन किए गए संरचनाओं की तुलना में अपेक्षाकृत बहुत छोटी हैं इस विधि का उपयोग जीवाणु, किटाणु, जीवाण्विक कशाभिका, जैविक झिल्ली संरचनाओं और प्रोटीन या प्रोटीन संरचना को देखने के लिए किया जाता है जिनमें सभी की इलेक्ट्रॉन-प्रकीर्णन सामर्थ्य कम होती है। कुछ अभिरंजन, जैसे ऑस्मियम टेट्रोक्साइड और ऑस्मियम फेरिकैनाइड रासायनिक रूप से बहुत सक्रिय होते हैं ऑक्सीडेंट के रूप में वे सामान्यतः असंतृप्त कार्बन-कार्बन बन्ध के साथ प्रतिक्रिया करके वसा को तिर्यक बंध करते हैं और इस प्रकार दोनों ऊतक के प्रतिदर्शों में जैविक झिल्ली को ठीक करते हैं और साथ ही उन्हें अभिरंजन देते हैं।[3][4]
इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी में ऋणात्मक अभिरंजन का चयन बहुत महत्वपूर्ण हो सकता है। एक रोगग्रस्त पौधे से ऋणात्मक रूप से अभिरंजन वाले पत्तों के सर्पण का उपयोग करने वाले पादप विषाणुओं के प्रारंभिक अध्ययन में एक अभिरंजन के साथ केवल वृत्तीय विषाणु और दूसरे के साथ केवल छड़ के आकार के विषाणु दिखाई देते है सत्यापित निष्कर्ष यह था कि यह पौधा दो अलग-अलग विषाणुओं के मिश्रित संक्रमण से पीड़ित था जब तक अधिक सुरक्षा सावधानियों का अनुसरण नहीं किया जाता है तब तक प्रकाश सूक्ष्मदर्शी और इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी दोनों स्तरों पर ऋणात्मक अभिरंजन कभी भी संक्रामक जीवों के साथ नहीं किया जाना चाहिए और ऋणात्मक अभिरंजन सामान्यतः एक बहुत ही कम तैयारी की विधि है इस प्रकार यह संक्रमण की संभावना को कम नहीं करता है।
अन्य अनुप्रयोग
ऋणात्मक अभिरंजन संचरण इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी को लैमेलर लिपोसोम्स (एलई), व्युत्क्रमित वृत्तीय मिसेलस (एम) और व्युत्क्रमित षट्कोणीय (एच-II) बेलनाकार (एच) चरणों (चित्र देखें) को जलीय वसा की संरचना के अध्ययन और पहचान के लिए सफलतापूर्वक नियोजित किया गया है।[5]
संदर्भ
- ↑ Woeste, S; Demchick, P (1991). "नकारात्मक दाग का नया संस्करण।". Applied and Environmental Microbiology. American Society for Microbiology. 57 (6): 1858–1859. doi:10.1128/aem.57.6.1858-1859.1991. ISSN 0099-2240. PMC 183484. PMID 1714705.
- ↑ D. Chadwick (2002). चिकनी पेशी में सार्कोप्लाज्मिक रेटिकुलम की भूमिका. John Wiley and Sons. pp. 259–264. ISBN 0-470-84479-5.
- ↑ Bozzola, John J.; Russell, Lonnie D. (1999). "Specimen Preparation for Transmission Electron Microscopy". Electron microscopy : principles and techniques for biologists. Sudbury, Mass.: Jones and Bartlett. pp. 21–31. ISBN 978-0-7637-0192-5.
- ↑ M. A. Hayat (2000). Principles and techniques of electron microscopy: biological applications. Cambridge University Press. pp. 45–61. ISBN 0-521-63287-0.
- ↑ Yashroy, R. C. (1990). "नकारात्मक धुंधला इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा लैमेलर फैलाव और क्लोरोप्लास्ट झिल्ली लिपिड का चरण पृथक्करण". Journal of Biosciences. Springer Science and Business Media LLC. 15 (2): 93–98. doi:10.1007/bf02703373. ISSN 0250-5991. S2CID 39712301.
बाहरी संबंध
| Library resources about Negative staining |
- "Negative staining for dummies". Retrieved 2009-06-06.
- "Negative staining". Archived from the original on 2012-12-25. Retrieved 2009-06-06.
