माइक्रोक्रिस्टल इलेक्ट्रॉन विवर्तन: Difference between revisions

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सूक्षमस्फटिक इलेक्ट्रॉन (अतिसूक्ष्म परमाणु) विवर्तन, या सूक्ष्मईडी,^[1]^[2] एक परिशीतन इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी विधि है जिसे 2013 के अंत में हावर्ड ह्यूजेस चिकित्सा संस्थान के जेनेलिया अनुसंधान शिविर में गोनन प्रयोगशाला द्वारा विकसित किया गया था। सूक्ष्मईडी इलेक्ट्रॉन स्फटिकी का एक रूप है जहां इलेक्ट्रॉन विवर्तन द्वारा संरचना निर्धारण के लिए पतले 3डी स्फटिक का उपयोग किया जाता है। इस प्रदर्शन से पहले, बृहदाण्विक (प्रोटीन) इलेक्ट्रॉन स्फटिकी का उपयोग केवल 2डी स्फटिक पर किया जाता था।^[3]^[4]

विधि को नैनोस्फटिक से प्रोटीन संरचना के लिए विकसित किया गया था जो सामान्यतः उनके आकार के कारण एक्स-रे विवर्तन के लिए उपयुक्त नहीं होते हैं।^[5] एक्स-रे स्फटिकी के लिए आवश्यक आकार के एक अरबवें हिस्से के स्फटिक उच्च गुणवत्ता वाले आंकड़े प्राप्त कर सकते हैं।^[6] प्रतिरूप अन्य सभी क्रायोईएम तौर-तरीकों के लिए जलयोजित हैं, लेकिन प्रतिबिंबन वृत्ति में पारेषण इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी (पारेषण इलेक्ट्रॉन क्रायोसूक्ष्मदर्शिकी) का उपयोग करने के स्थान पर एक अत्यंत कम इलेक्ट्रॉन जोखिम (सामान्यतः < 0.01 e⁻/Å²/s) के साथ विवर्तन वृत्ति में इसका उपयोग करता है। नैनो स्फटिक विवर्तक किरण के संपर्क में आता है और लगातार घूमता रहता है^[2] जबकि चलचित्र के रूप में एक तीव्र कैमरे पर विवर्तन एकत्र किया जाता है।^[2] संरचना विश्लेषण और शोधन के लिए विशेष सॉफ़्टवेयर की आवश्यकता के बिना एक्स - रे स्फटिकी के लिए पारंपरिक सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके सूक्ष्मएड आंकड़ों को संसाधित किया जाता है।^[7] महत्वपूर्ण रूप से, सूक्ष्मएड प्रयोग में उपयोग किए जाने वाले हार्डवेयर और सॉफ़्टवेयर दोनों मानक और स्थूलतः उपलब्ध हैं।^[8]<re f चाटना = नानेंगा 369-379>नंनेंगा, Brent L.; गोनन, Tamir (May 2019). "क्रायो-ईएम विधि माइक्रोक्रिस्टल इलेक्ट्रॉन विवर्तन (माइक्रोईडी)". प्राकृतिक तरीके (in English). 16 (5): 369–379. doi:10.1038/s41592-019-0395-x. ISSN 1548-7091.</ref>

विकास

सूक्ष्मएड का पहला सफल प्रदर्शन 2013 में तामीर गोनन प्रयोगशाला द्वारा प्रतिवेदन किया गया था।^[1] लाइसोजाइम का स्वरूप, एक्स-रे स्फटिकी में एक उत्कृष्ट परीक्षण प्रोटीन है। यह पहली बार था कि इलेक्ट्रॉन विवर्तन का उपयोग करके 3डी स्फटिक से प्रोटीन संरचना निर्धारित की गई थी। अब्राहम समूह ने स्वतंत्र रूप से लाइसोजाइम स्फटिक पर मेडिपिक्स परिमाण क्षेत्रफल संसूचक का उपयोग करके क्रमावर्तन इलेक्ट्रॉन विवर्तन आंकड़े संग्रह एकत्र करने की सूचना दी लेकिन संरचना को हल करने में असमर्थ थे।^[9]

प्रायोगिक व्यवस्थापन

इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी की स्थापना और आंकड़े संग्रह के लिए विस्तृत विज्ञप्ति प्रकाशित किए गए हैं।^[10]

यंत्र विन्यास

सूक्ष्मदर्शी

पारेषण इलेक्ट्रॉन (परिशीतन) सूक्ष्मदर्शिकी का उपयोग करके सूक्ष्मईडी आंकड़े एकत्र किया जाता है। सूक्ष्मदर्शी को एक चयनित क्षेत्र द्वारक से सुसज्जित किया जा सकता है लेकिन सूक्ष्मएड को चयनित क्षेत्र द्वारक के बिना भी किया जा सकता है। जबकि कुछ संरचनाओं को हिमीकरण के बिना सूचित किया गया है, विकिरण क्षति को बहुत कम किया गया है और छोटे अणुओं के लिए भी क्रायो शीतलन का उपयोग करके उच्च विश्लेषण प्राप्त किया गया है।^[11]

संसूचक

सूक्ष्मईडी प्रयोगों में इलेक्ट्रॉन विवर्तन आंकड़े एकत्र करने के लिए विभिन्न प्रकार के संसूचकों का उपयोग किया गया है। आवेश युग्मित युक्ति (सीसीडी) और पूरक धातु-ऑक्साइड-अर्धचालक (सीएमओएस) तकनीक का उपयोग करने वाले संसूचकों का उपयोग किया गया है। सीएमओएस संसूचकों के साथ, अलग-अलग इलेक्ट्रॉन गणनाओं की व्याख्या की जा सकती है।^[12] हाल ही में, रैखिक और गिनती वृत्ति दोनों में प्रत्यक्ष इलेक्ट्रॉन संसूचकों का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है।^[13]^[14] इन उदाहरणों में इलेक्ट्रॉन की गणना ने प्रोटीन में हाइड्रोजन के प्रारंभिक चरणबद्धता और मानसिक चित्रण की अनुमति दी।

आंकड़े संग्रह

अभी भी विसरण

सूक्ष्मईडी पर अवधारणा प्रकाशन का प्रारंभिक प्रमाण लाइसोजाइम स्फटिक का उपयोग करता है।^[1] प्रधार के बीच असतत 1 डिग्री चरणों के साथ, एकल नैनो स्फटिक से 90 डिग्री तक आंकड़े एकत्र किया गया था। प्रत्येक विवर्तन प्रतिरूप को ∼0.01 e⁻/Å²/s की अति-निम्न खुराक दर के साथ एकत्र किया गया था। 3 स्फटिक से आंकड़ा विलय किया गया था^[15] अच्छे शोधन आँकड़ों के साथ 2.9Å विश्लेषण संरचना प्राप्त करने के लिए, और पहली बार प्रतिनिधित्व किया^[15] परिशीतन स्थितियों में 3डी सूक्षमस्फटिक से खुराक के प्रति संवेदनशील प्रोटीन की संरचना का निर्धारण करने के लिए इलेक्ट्रॉन विवर्तन का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया था।

निरंतर चरण क्रमावर्तन

आंकड़े संग्रह योजना के दौरान निरंतर क्रमावर्तन लागू करके घटक पत्र के प्रमाण के तुरंत बाद सूक्ष्मईडी में सुधार किया गया था।^[2] यहां स्फटिक को धीरे-धीरे एक ही दिशा में घुमाया जाता है जबकि विवर्तन को तीव्र कैमरे पर चलचित्र के रूप में अभिलेखबद्ध किया जाता है। कार्यप्रणाली एक्स-रे स्फटिकी में क्रमावर्तन विधि की तरह है। इससे आंकड़े गुणवत्ता में कई सुधार हुए और मानक एक्स-रे क्रिस्टलिकी सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके आंकड़े प्रसंस्करण की अनुमति मिली।^[2]निरंतर क्रमावर्तन के लाभों में सूक्ष्मईडी में गतिशील प्रकीर्णन में कमी ^[16] और पारस्परिक स्थान का बेहतर प्रतिचयन सम्मिलित है। 2014 से निरंतर-क्रमावर्तन सूक्ष्मईडी आंकड़े संग्रह का मानक तरीका है।

आंकड़ा संसाधन

सूक्ष्मईडी आंकड़ा संसाधन के लिए विस्तृत विज्ञप्ति प्रकाशित किए गए हैं।^[7] जब निरंतर चरण क्रमावर्तन का उपयोग करके सूक्ष्मईडी आंकड़े एकत्र किया जाता है, तो मानक :श्रेणी: स्फटिकी सॉफ्टवेयर का उपयोग किया जा सकता है।

सूक्ष्मईडी और अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों के बीच अंतर

अकार्बनिक लवण जैसे विकिरण असंवेदनशील सामग्री के भौतिक विज्ञान के लिए विकसित अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों में स्वचालित विवर्तन टोमोग्राफी (ADT) ^[17] और क्रमावर्तन इलेक्ट्रॉन विवर्तन (लाल^[18]) सम्मिलित हैं। ये विधियां सूक्ष्मईडी से काफी भिन्न हैं: एडीटी में कोणमापी झुकाव के असतत चरणों का उपयोग अंतराल को भरने के लिए किरण पुरस्सरण के संयोजन में पारस्परिक स्थान को आच्छादित करने के लिए किया जाता है।^[17] ADT स्फटिक अनुसरण के लिए अग्रगमन और ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी रेखाचित्रण के लिए विशेष हार्डवेयर का उपयोग करता है।^[17] आरईडी टीईएम में किया जाता है लेकिन कोणमापी असतत चरणों में स्थूलतः झुका हुआ होता है और अंतराल को भरने के लिए किरणपुंज अभिनमन का उपयोग किया जाता है।^[18] ADT और RED आंकड़े को संसाधित करने के लिए विशेष सॉफ़्टवेयर का उपयोग किया जाता है।^[18] महत्वपूर्ण रूप से, ADT और RED को विकिरण असंवेदनशील अकार्बनिक सामग्री और लवणों पर विकसित और परीक्षण किया गया था और जमे हुए जलयोजित अवस्था में अध्ययन किए गए प्रोटीन या विकिरण संवेदनशील कार्बनिक पदार्थों के साथ उपयोग के लिए प्रदर्शित नहीं किया गया है।

मील के पत्थर

प्रणाली विस्तार

बड़े गोलाकार प्रोटीन की संरचनाओं को निर्धारित करने के लिए सूक्ष्मईडी का उपयोग किया गया है,^[19] छोटे प्रोटीन,^[2] पेप्टाइड,^[20] झिल्ली प्रोटीन,^[21] कार्बनिक अणु,^[22]^[23] और अकार्बनिक यौगिक।^[24] इनमें से कई उदाहरणों में हाइड्रोजन और आवेशित आयन देखे गए।^[20]^[21]

पार्किंसंस रोग के α-सिन्यूक्लिन की नवीन संरचना

सूक्ष्मईडी द्वारा हल की गई पहली उपन्यास संरचनाएं 2015 के अंत में प्रकाशित हुई थीं।^[20] ये संरचनाएं पेप्टाइड अंशों की थीं जो पार्किंसंस रोग के लिए उत्तरदायी प्रोटीन α-सिंक्युलिन के विषाक्त अंतर्भाग का निर्माण करती हैं और एकत्रीकरण तंत्र विषाक्त समुच्चय में अंतर्दृष्टि का नेतृत्व करती हैं। संरचनाओं को 1.4 Å विश्लेषण पर हल किया गया था।

R2lox की नई प्रोटीन संरचना

सूक्ष्मईडी द्वारा हल की गई प्रोटीन की पहली उपन्यास संरचना 2019 में प्रकाशित हुई थी।^[25] प्रोटीन सल्फ़ोलोबस एसिडोकैल्डेरियस से धातुएन्ज़ाइम आर2-प्रकार संलग्नी-बाध्यकारी ऑक्सीडेज (आर2लोक्स) है। ज्ञात संरचना के साथ निकटतम होमोलॉग से निर्मित 35% अनुक्रम पहचान के प्रतिरूप का उपयोग करके आणविक प्रतिस्थापन द्वारा संरचना को 3.0 Å विश्लेषण पर हल किया गया था। इस काम ने प्रदर्शित किया कि प्रोटीन की अज्ञात संरचना प्राप्त करने के लिए सूक्ष्मईडी का उपयोग किया जा सकता है।

सूक्ष्मईडी शिक्षा और सेवाओं तक पहुंच

सूक्ष्मईडी के बारे में अधिक जानने के लिए, कोई वार्षिक सूक्ष्मईडी यूसीएलए में प्रतिबिंबन केंद्र पाठ्यक्रम या [1] में भाग ले सकता है। परिशीतन इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी विधियों से संबंधित आगामी बैठकों और कार्यशालाओं के बारे में अधिक जानकारी के लिए, कृपया 3DEM बैठकें और कार्यशालाएं पृष्ठ देखें।

कई विश्वविद्यालय और कंपनियां सूक्ष्मईडी सेवाएं प्रदान करती हैं, जिनमें एमईडीआईसी - यूसीएलए में सूक्षमस्फटिक इलेक्ट्रॉन विवर्तन प्रतिबिंबन केंद्र और नैनोप्रतिबिंबन सेवाएं सम्मिलित हैं ।

कई इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी प्रणाली सूक्ष्मएड आंकड़े अभिलेखबद्ध करने में सक्षम हैं जिनमें जेईओएल और थर्मो फिशर/एफईआई द्वारा विकसित आंकड़े सम्मिलित हैं।

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-माइक्रोक्रिस्टल इलेक्ट्रॉन विवर्तन, या माइक्रोईडी,<ref name=":0">{{Cite journal|last1=Shi|first1=Dan|last2=Nannenga|first2=Brent L|last3=Iadanza|first3=Matthew G|last4=Gonen|first4=Tamir|date=2013-11-19|title=प्रोटीन माइक्रोक्रिस्टल की त्रि-आयामी इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी|journal=eLife|volume=2|pages=e01345|doi=10.7554/elife.01345|pmid=24252878|pmc=3831942|issn=2050-084X}}</ref><ref name=":1">{{Cite journal|last1=Nannenga|first1=Brent L|last2=Shi|first2=Dan|last3=Leslie|first3=Andrew G W|last4=Gonen|first4=Tamir|date=2014-08-03|title=माइक्रोईडी में निरंतर-रोटेशन डेटा संग्रह द्वारा उच्च-रिज़ॉल्यूशन संरचना निर्धारण|journal=Nature Methods|volume=11|issue=9|pages=927–930|doi=10.1038/nmeth.3043|pmid=25086503|pmc=4149488|issn=1548-7091}}</ref> एक [[क्रायोजेनिक इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी]] विधि है जिसे 2013 के अंत में [[हावर्ड ह्यूजेस मेडिकल इंस्टीट्यूट]] के [[जेनेलिया रिसर्च कैंपस]] में [[मरम्मत चला गया]] प्रयोगशाला द्वारा विकसित किया गया था। माइक्रोईडी [[इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी]] का एक रूप है जहां [[इलेक्ट्रॉन विवर्तन]] द्वारा संरचना निर्धारण के लिए पतले 3डी क्रिस्टल का उपयोग किया जाता है। इस प्रदर्शन से पहले, मैक्रोमोलेक्यूलर (प्रोटीन) इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी का उपयोग केवल 2डी क्रिस्टल पर किया जाता था, उदाहरण के लिए।<ref>{{Cite journal |last=Gonen |first=Tamir |last2=Sliz |first2=Piotr |last3=Kistler |first3=Joerg |last4=Cheng |first4=Yifan |last5=Walz |first5=Thomas |date=May 2004 |title=Aquaporin-0 मेम्ब्रेन जंक्शन एक बंद पानी के छिद्र की संरचना को प्रकट करते हैं|url=https://www.nature.com/articles/nature02503 |journal=Nature |language=en |volume=429 |issue=6988 |pages=193–197 |doi=10.1038/nature02503 |issn=1476-4687}}</ref><ref>{{Cite journal |last=Walz |first=Thomas |last2=Hirai |first2=Teruhisa |last3=Murata |first3=Kazuyoshi |last4=Heymann |first4=J. Bernard |last5=Mitsuoka |first5=Kaoru |last6=Fujiyoshi |first6=Yoshinori |last7=Smith |first7=Barbara L. |last8=Agre |first8=Peter |last9=Engel |first9=Andreas |date=June 1997 |title=एक्वापोरिन -1 की त्रि-आयामी संरचना|url=http://www.nature.com/articles/42512 |journal=Nature |language=en |volume=387 |issue=6633 |pages=624–627 |doi=10.1038/42512 |issn=0028-0836}}</ref>
+सूक्षमस्फटिक इलेक्ट्रॉन (अतिसूक्ष्म परमाणु) विवर्तन, या सूक्ष्मईडी,<ref name=":0">{{Cite journal|last1=Shi|first1=Dan|last2=Nannenga|first2=Brent L|last3=Iadanza|first3=Matthew G|last4=Gonen|first4=Tamir|date=2013-11-19|title=प्रोटीन माइक्रोक्रिस्टल की त्रि-आयामी इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी|journal=eLife|volume=2|pages=e01345|doi=10.7554/elife.01345|pmid=24252878|pmc=3831942|issn=2050-084X}}</ref><ref name=":1">{{Cite journal|last1=Nannenga|first1=Brent L|last2=Shi|first2=Dan|last3=Leslie|first3=Andrew G W|last4=Gonen|first4=Tamir|date=2014-08-03|title=माइक्रोईडी में निरंतर-रोटेशन डेटा संग्रह द्वारा उच्च-रिज़ॉल्यूशन संरचना निर्धारण|journal=Nature Methods|volume=11|issue=9|pages=927–930|doi=10.1038/nmeth.3043|pmid=25086503|pmc=4149488|issn=1548-7091}}</ref> एक [[क्रायोजेनिक इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी|परिशीतन इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी]] विधि है जिसे 2013 के अंत में [[हावर्ड ह्यूजेस मेडिकल इंस्टीट्यूट|हावर्ड ह्यूजेस चिकित्सा संस्थान]] के [[जेनेलिया रिसर्च कैंपस|जेनेलिया अनुसंधान शिविर]] में [[मरम्मत चला गया|गोनन]] प्रयोगशाला द्वारा विकसित किया गया था। सूक्ष्मईडी [[इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी|इलेक्ट्रॉन स्फटिकी]] का एक रूप है जहां [[इलेक्ट्रॉन विवर्तन]] द्वारा संरचना निर्धारण के लिए पतले 3डी स्फटिक का उपयोग किया जाता है। इस प्रदर्शन से पहले, बृहदाण्विक (प्रोटीन) इलेक्ट्रॉन स्फटिकी का उपयोग केवल 2डी स्फटिक पर किया जाता था।<ref>{{Cite journal |last=Gonen |first=Tamir |last2=Sliz |first2=Piotr |last3=Kistler |first3=Joerg |last4=Cheng |first4=Yifan |last5=Walz |first5=Thomas |date=May 2004 |title=Aquaporin-0 मेम्ब्रेन जंक्शन एक बंद पानी के छिद्र की संरचना को प्रकट करते हैं|url=https://www.nature.com/articles/nature02503 |journal=Nature |language=en |volume=429 |issue=6988 |pages=193–197 |doi=10.1038/nature02503 |issn=1476-4687}}</ref><ref>{{Cite journal |last=Walz |first=Thomas |last2=Hirai |first2=Teruhisa |last3=Murata |first3=Kazuyoshi |last4=Heymann |first4=J. Bernard |last5=Mitsuoka |first5=Kaoru |last6=Fujiyoshi |first6=Yoshinori |last7=Smith |first7=Barbara L. |last8=Agre |first8=Peter |last9=Engel |first9=Andreas |date=June 1997 |title=एक्वापोरिन -1 की त्रि-आयामी संरचना|url=http://www.nature.com/articles/42512 |journal=Nature |language=en |volume=387 |issue=6633 |pages=624–627 |doi=10.1038/42512 |issn=0028-0836}}</ref>
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+विधि को [[ nanocrystal |नैनोस्फटिक]] से [[प्रोटीन संरचना]] के लिए विकसित किया गया था जो सामान्यतः उनके आकार के कारण एक्स-रे विवर्तन के लिए उपयुक्त नहीं होते हैं।<ref>{{Cite journal |last=Shi |first=Dan |last2=Nannenga |first2=Brent L |last3=de la Cruz |first3=M Jason |last4=Liu |first4=Jinyang |last5=Sawtelle |first5=Steven |last6=Calero |first6=Guillermo |last7=Reyes |first7=Francis E |last8=Hattne |first8=Johan |last9=Gonen |first9=Tamir |date=May 2016 |title=मैक्रोमोलेक्युलर क्रिस्टलोग्राफी के लिए माइक्रोईडी डेटा का संग्रह|url=http://www.nature.com/articles/nprot.2016.046 |journal=Nature Protocols |language=en |volume=11 |issue=5 |pages=895–904 |doi=10.1038/nprot.2016.046 |issn=1754-2189 |pmc=5357465 |pmid=27077331}}</ref> एक्स-रे स्फटिकी के लिए आवश्यक आकार के एक अरबवें हिस्से के स्फटिक उच्च गुणवत्ता वाले आंकड़े प्राप्त कर सकते हैं।<ref>{{Cite journal|last1=de la Cruz|first1=M Jason|last2=Hattne|first2=Johan|last3=Shi|first3=Dan|last4=Seidler|first4=Paul|last5=Rodriguez|first5=Jose|last6=Reyes|first6=Francis E|last7=Sawaya|first7=Michael R|last8=Cascio|first8=Duilio|last9=Weiss|first9=Simon C|date=2017|title=क्रायोईएम विधि माइक्रोईडी के साथ खंडित प्रोटीन क्रिस्टल से परमाणु-रिज़ॉल्यूशन संरचनाएं|journal=Nature Methods|language=En|volume=14|issue=4|pages=399–402|doi=10.1038/nmeth.4178|issn=1548-7091|pmc=5376236|pmid=28192420}}</ref> प्रतिरूप अन्य सभी क्रायोईएम तौर-तरीकों के लिए जलयोजित हैं, लेकिन प्रतिबिंबन वृत्ति में [[ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी|पारेषण इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी]] ([[ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन क्रायोमाइक्रोस्कोपी|पारेषण इलेक्ट्रॉन क्रायोसूक्ष्मदर्शिकी]]) का उपयोग करने के स्थान पर एक अत्यंत कम इलेक्ट्रॉन जोखिम (सामान्यतः < 0.01 e<sup>−</sup>/Å<sup>2</sup>/s) के साथ [[विवर्तन]] वृत्ति में इसका उपयोग करता है। नैनो स्फटिक विवर्तक किरण के संपर्क में आता है और लगातार घूमता रहता है<ref name=":1" /> जबकि चलचित्र के रूप में एक तीव्र कैमरे पर विवर्तन एकत्र किया जाता है।<ref name=":1" /> संरचना विश्लेषण और शोधन के लिए विशेष सॉफ़्टवेयर की आवश्यकता के बिना [[एक्स - रे क्रिस्टलोग्राफी|एक्स - रे स्फटिकी]] के लिए पारंपरिक सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके सूक्ष्मएड आंकड़ों को संसाधित किया जाता है।<ref name=":2">{{Cite journal|last1=Hattne|first1=Johan|last2=Reyes|first2=Francis E.|last3=Nannenga|first3=Brent L.|last4=Shi|first4=Dan|last5=de la Cruz|first5=M. Jason|last6=Leslie|first6=Andrew G. W.|last7=Gonen|first7=Tamir|date=2015-07-01|title=माइक्रोईडी डेटा संग्रह और प्रसंस्करण|journal=Acta Crystallographica Section A|language=en|volume=71|issue=4|pages=353–360|doi=10.1107/s2053273315010669|issn=2053-2733|pmc=4487423|pmid=26131894}}</ref> महत्वपूर्ण रूप से, सूक्ष्मएड प्रयोग में उपयोग किए जाने वाले हार्डवेयर और सॉफ़्टवेयर दोनों मानक और स्थूलतः उपलब्ध हैं।<ref>{{Cite journal |last=Zatsepin |first=Nadia A |last2=Li |first2=Chufeng |last3=Colasurd |first3=Paige |last4=Nannenga |first4=Brent L |date=October 2019 |title=माइक्रोक्रिस्टल से संरचना निर्धारण के लिए सीरियल फेमटोसेकंड क्रिस्टलोग्राफी और माइक्रोईडी की संपूरकता|url=https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S0959440X18300575 |journal=Current Opinion in Structural Biology |language=en |volume=58 |pages=286–293 |doi=10.1016/j.sbi.2019.06.004 |pmc=6778504 |pmid=31345629}}</ref><re f चाटना = नानेंगा 369-379>{{Cite journal |last=नंनेंगा |first=Brent L. |last2=गोनन |first2=Tamir |date=May 2019 |title=क्रायो-ईएम विधि माइक्रोक्रिस्टल इलेक्ट्रॉन विवर्तन (माइक्रोईडी)|url=http://www.nature.com/articles/s41592-019-0395-x |journal=प्राकृतिक तरीके |language=en |volume=16 |issue=5 |pages=369–379 |doi=10.1038/s41592-019-0395-x |issn=1548-7091}}<nowiki></ref></nowiki>
 == विकास ==
-माइक्रोएड का पहला सफल प्रदर्शन 2013 में तामीर गोनन प्रयोगशाला द्वारा रिपोर्ट किया गया था।<ref name=":0" />  [[लाइसोजाइम]] की संरचना, एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी में एक क्लासिक परीक्षण प्रोटीन। यह पहली बार था कि इलेक्ट्रॉन विवर्तन का उपयोग करके 3डी क्रिस्टल से प्रोटीन संरचना निर्धारित की गई थी। अब्राहम समूह ने स्वतंत्र रूप से लाइसोजाइम क्रिस्टल पर [[मेडिपिक्स]] क्वांटम एरिया डिटेक्टर का उपयोग करके रोटेशन इलेक्ट्रॉन विवर्तन डेटा संग्रह एकत्र करने की सूचना दी लेकिन संरचना को हल करने में असमर्थ थे।<ref>{{Cite journal|last1=Nederlof|first1=I.|last2=van Genderen|first2=E.|last3=Li|first3=Y.-W.|last4=Abrahams|first4=J. P.|date=2013-07-01|title=एक मेडिपिक्स क्वांटम एरिया डिटेक्टर सबमाइक्रोमीटर त्रि-आयामी प्रोटीन क्रिस्टल से रोटेशन इलेक्ट्रॉन विवर्तन डेटा संग्रह की अनुमति देता है|url=http://scripts.iucr.org/cgi-bin/paper?ba5186|journal=Acta Crystallographica Section D|language=en|volume=69|issue=7|pages=1223–1230|doi=10.1107/S0907444913009700|issn=0907-4449|pmc=3689525|pmid=23793148}}</ref>
+सूक्ष्मएड का पहला सफल प्रदर्शन 2013 में तामीर गोनन प्रयोगशाला द्वारा प्रतिवेदन किया गया था।<ref name=":0" /> [[लाइसोजाइम]] का स्वरूप, एक्स-रे स्फटिकी में एक उत्कृष्ट परीक्षण प्रोटीन है। यह पहली बार था कि इलेक्ट्रॉन विवर्तन का उपयोग करके 3डी स्फटिक से प्रोटीन संरचना निर्धारित की गई थी। अब्राहम समूह ने स्वतंत्र रूप से लाइसोजाइम स्फटिक पर [[मेडिपिक्स]] परिमाण क्षेत्रफल संसूचक का उपयोग करके क्रमावर्तन इलेक्ट्रॉन विवर्तन आंकड़े संग्रह एकत्र करने की सूचना दी लेकिन संरचना को हल करने में असमर्थ थे।<ref>{{Cite journal|last1=Nederlof|first1=I.|last2=van Genderen|first2=E.|last3=Li|first3=Y.-W.|last4=Abrahams|first4=J. P.|date=2013-07-01|title=एक मेडिपिक्स क्वांटम एरिया डिटेक्टर सबमाइक्रोमीटर त्रि-आयामी प्रोटीन क्रिस्टल से रोटेशन इलेक्ट्रॉन विवर्तन डेटा संग्रह की अनुमति देता है|url=http://scripts.iucr.org/cgi-bin/paper?ba5186|journal=Acta Crystallographica Section D|language=en|volume=69|issue=7|pages=1223–1230|doi=10.1107/S0907444913009700|issn=0907-4449|pmc=3689525|pmid=23793148}}</ref>
-== प्रायोगिक सेटअप ==
+== प्रायोगिक व्यवस्थापन ==
-इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप की स्थापना और डेटा संग्रह के लिए विस्तृत प्रोटोकॉल प्रकाशित किए गए हैं।<ref>{{Cite journal|last1=Shi|first1=Dan|last2=Nannenga|first2=Brent L|last3=de la Cruz|first3=M Jason|last4=Liu|first4=Jinyang|last5=Sawtelle|first5=Steven|last6=Calero|first6=Guillermo|last7=Reyes|first7=Francis E|last8=Hattne|first8=Johan|last9=Gonen|first9=Tamir|date=2016-04-14|title=मैक्रोमोलेक्युलर क्रिस्टलोग्राफी के लिए माइक्रोईडी डेटा का संग्रह|journal=Nature Protocols|language=En|volume=11|issue=5|pages=895–904|doi=10.1038/nprot.2016.046|issn=1754-2189|pmc=5357465|pmid=27077331}}</ref>
+इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी की स्थापना और आंकड़े संग्रह के लिए विस्तृत विज्ञप्ति प्रकाशित किए गए हैं।<ref>{{Cite journal|last1=Shi|first1=Dan|last2=Nannenga|first2=Brent L|last3=de la Cruz|first3=M Jason|last4=Liu|first4=Jinyang|last5=Sawtelle|first5=Steven|last6=Calero|first6=Guillermo|last7=Reyes|first7=Francis E|last8=Hattne|first8=Johan|last9=Gonen|first9=Tamir|date=2016-04-14|title=मैक्रोमोलेक्युलर क्रिस्टलोग्राफी के लिए माइक्रोईडी डेटा का संग्रह|journal=Nature Protocols|language=En|volume=11|issue=5|pages=895–904|doi=10.1038/nprot.2016.046|issn=1754-2189|pmc=5357465|pmid=27077331}}</ref>
-=== इंस्ट्रूमेंटेशन ===
+=== यंत्र विन्यास ===
 ==== सूक्ष्मदर्शी ====
-ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन क्रायोमिक्रोस्कोपी | ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन (क्रायोजेनिक) माइक्रोस्कोपी का उपयोग करके माइक्रोईडी डेटा एकत्र किया जाता है। माइक्रोस्कोप को एक चयनित क्षेत्र एपर्चर से लैस किया जा सकता है लेकिन माइक्रोएड को चयनित क्षेत्र एपर्चर के बिना भी किया जा सकता है। जबकि कुछ संरचनाओं को ठंड के बिना सूचित किया गया है, विकिरण क्षति को बहुत कम किया गया है और छोटे अणुओं के लिए भी क्रायो कूलिंग का उपयोग करके उच्च रिज़ॉल्यूशन प्राप्त किया गया है।<ref>{{Cite journal |last=Christensen |first=Jeppe |last2=Horton |first2=Peter N. |last3=Bury |first3=Charles S. |last4=Dickerson |first4=Joshua L. |last5=Taberman |first5=Helena |last6=Garman |first6=Elspeth F. |last7=Coles |first7=Simon J. |date=2019-07-01 |title=Radiation damage in small-molecule crystallography: fact not fiction |url=https://scripts.iucr.org/cgi-bin/paper?S2052252519006948 |journal=IUCrJ |volume=6 |issue=4 |pages=703–713 |doi=10.1107/S2052252519006948 |issn=2052-2525 |pmc=6608633 |pmid=31316814}}</ref>
+पारेषण इलेक्ट्रॉन (परिशीतन) सूक्ष्मदर्शिकी का उपयोग करके सूक्ष्मईडी आंकड़े एकत्र किया जाता है। सूक्ष्मदर्शी को एक चयनित क्षेत्र द्वारक से सुसज्जित किया जा सकता है लेकिन सूक्ष्मएड को चयनित क्षेत्र द्वारक के बिना भी किया जा सकता है। जबकि कुछ संरचनाओं को हिमीकरण के बिना सूचित किया गया है, विकिरण क्षति को बहुत कम किया गया है और छोटे अणुओं के लिए भी क्रायो शीतलन का उपयोग करके उच्च विश्लेषण प्राप्त किया गया है।<ref>{{Cite journal |last=Christensen |first=Jeppe |last2=Horton |first2=Peter N. |last3=Bury |first3=Charles S. |last4=Dickerson |first4=Joshua L. |last5=Taberman |first5=Helena |last6=Garman |first6=Elspeth F. |last7=Coles |first7=Simon J. |date=2019-07-01 |title=Radiation damage in small-molecule crystallography: fact not fiction |url=https://scripts.iucr.org/cgi-bin/paper?S2052252519006948 |journal=IUCrJ |volume=6 |issue=4 |pages=703–713 |doi=10.1107/S2052252519006948 |issn=2052-2525 |pmc=6608633 |pmid=31316814}}</ref>
-==== डिटेक्टर ====
+==== संसूचक ====
-माइक्रोईडी प्रयोगों में इलेक्ट्रॉन विवर्तन डेटा एकत्र करने के लिए विभिन्न प्रकार के डिटेक्टरों का उपयोग किया गया है। चार्ज-युग्मित डिवाइस | चार्ज-युग्मित डिवाइस (सीसीडी) और सीएमओएस | पूरक धातु-ऑक्साइड-सेमीकंडक्टर (सीएमओएस) तकनीक का उपयोग करने वाले डिटेक्टरों का उपयोग किया गया है। CMOS डिटेक्टरों के साथ, अलग-अलग इलेक्ट्रॉन गणनाओं की व्याख्या की जा सकती है।<ref>See also https://www.gatan.com/ccd-vs-cmos and https://www.gatan.com/techniques/imaging.</ref> हाल ही में, रैखिक और गिनती मोड दोनों में प्रत्यक्ष इलेक्ट्रॉन डिटेक्टरों का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है।<ref>{{Cite journal |last=Martynowycz |first=Michael W. |last2=Clabbers |first2=Max T. B. |last3=Hattne |first3=Johan |last4=Gonen |first4=Tamir |date=June 2022 |title=इलेक्ट्रॉन-गिने गए माइक्रोईडी डेटा का उपयोग करते हुए एब इनिटियो चरणबद्ध मैक्रोमोलेक्यूलर संरचनाएं|url=https://www.nature.com/articles/s41592-022-01485-4 |journal=Nature Methods |language=en |volume=19 |issue=6 |pages=724–729 |doi=10.1038/s41592-022-01485-4 |issn=1548-7091 |pmc=9184278 |pmid=35637302}}</ref><ref>{{Cite journal |last=Clabbers |first=Max T.B. |last2=Martynowycz |first2=Michael W. |last3=Hattne |first3=Johan |last4=Gonen |first4=Tamir |date=2022 |title=मैक्रोमोलेक्यूलर माइक्रोईडी डेटा में हाइड्रोजन और हाइड्रोजन-बॉन्ड नेटवर्क|url=https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S2590152422000198 |journal=Journal of Structural Biology: X |language=en |volume=6 |pages=100078 |doi=10.1016/j.yjsbx.2022.100078 |pmc=9731847 |pmid=36507068}}</ref> इन उदाहरणों में इलेक्ट्रॉन की गणना ने प्रोटीन में हाइड्रोजन के प्रारंभिक चरणबद्धता और विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति दी।
+सूक्ष्मईडी प्रयोगों में इलेक्ट्रॉन विवर्तन आंकड़े एकत्र करने के लिए विभिन्न प्रकार के संसूचकों का उपयोग किया गया है। आवेश युग्मित युक्ति (सीसीडी) और पूरक धातु-ऑक्साइड-अर्धचालक (सीएमओएस) तकनीक का उपयोग करने वाले संसूचकों का उपयोग किया गया है। सीएमओएस संसूचकों के साथ, अलग-अलग इलेक्ट्रॉन गणनाओं की व्याख्या की जा सकती है।<ref>See also https://www.gatan.com/ccd-vs-cmos and https://www.gatan.com/techniques/imaging.</ref> हाल ही में, रैखिक और गिनती वृत्ति दोनों में प्रत्यक्ष इलेक्ट्रॉन संसूचकों का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया है।<ref>{{Cite journal |last=Martynowycz |first=Michael W. |last2=Clabbers |first2=Max T. B. |last3=Hattne |first3=Johan |last4=Gonen |first4=Tamir |date=June 2022 |title=इलेक्ट्रॉन-गिने गए माइक्रोईडी डेटा का उपयोग करते हुए एब इनिटियो चरणबद्ध मैक्रोमोलेक्यूलर संरचनाएं|url=https://www.nature.com/articles/s41592-022-01485-4 |journal=Nature Methods |language=en |volume=19 |issue=6 |pages=724–729 |doi=10.1038/s41592-022-01485-4 |issn=1548-7091 |pmc=9184278 |pmid=35637302}}</ref><ref>{{Cite journal |last=Clabbers |first=Max T.B. |last2=Martynowycz |first2=Michael W. |last3=Hattne |first3=Johan |last4=Gonen |first4=Tamir |date=2022 |title=मैक्रोमोलेक्यूलर माइक्रोईडी डेटा में हाइड्रोजन और हाइड्रोजन-बॉन्ड नेटवर्क|url=https://linkinghub.elsevier.com/retrieve/pii/S2590152422000198 |journal=Journal of Structural Biology: X |language=en |volume=6 |pages=100078 |doi=10.1016/j.yjsbx.2022.100078 |pmc=9731847 |pmid=36507068}}</ref> इन उदाहरणों में इलेक्ट्रॉन की गणना ने प्रोटीन में हाइड्रोजन के प्रारंभिक चरणबद्धता और मानसिक चित्रण की अनुमति दी।
-=== डेटा संग्रह ===
+=== आंकड़े संग्रह ===
-==== अभी भी विवर्तन ====
+==== अभी भी विसरण ====
-माइक्रोईडी पर अवधारणा प्रकाशन का प्रारंभिक प्रमाण लाइसोजाइम क्रिस्टल का उपयोग करता है।<ref name=":0" />फ़्रेमों के बीच असतत 1 डिग्री चरणों के साथ, एकल नैनो क्रिस्टल से 90 डिग्री तक डेटा एकत्र किया गया था। प्रत्येक विवर्तन पैटर्न को-0.01 ई की अति-निम्न खुराक दर के साथ एकत्र किया गया था<sup>−</sup>/Å<sup>2</sup>/से. 3 क्रिस्टल से डेटा मर्ज किया गया था<ref name="Shi e01345">{{Cite journal |last=Shi |first=Dan |last2=Nannenga |first2=Brent L |last3=Iadanza |first3=Matthew G |last4=Gonen |first4=Tamir |date=2013-11-19 |title=प्रोटीन माइक्रोक्रिस्टल की त्रि-आयामी इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी|url=https://elifesciences.org/articles/01345 |journal=eLife |language=en |volume=2 |pages=e01345 |doi=10.7554/eLife.01345 |issn=2050-084X}}</ref> अच्छे शोधन आँकड़ों के साथ 2.9Å रिज़ॉल्यूशन संरचना प्राप्त करने के लिए, और पहली बार प्रतिनिधित्व किया<ref name="Shi e01345"/>क्रायोजेनिक स्थितियों में 3डी माइक्रोक्रिस्टल से खुराक के प्रति संवेदनशील प्रोटीन की संरचना का निर्धारण करने के लिए इलेक्ट्रॉन विवर्तन का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया था।
+सूक्ष्मईडी पर अवधारणा प्रकाशन का प्रारंभिक प्रमाण लाइसोजाइम स्फटिक का उपयोग करता है।<ref name=":0" /> प्रधार के बीच असतत 1 डिग्री चरणों के साथ, एकल नैनो स्फटिक से 90 डिग्री तक आंकड़े एकत्र किया गया था। प्रत्येक विवर्तन प्रतिरूप को ∼0.01 e<sup>−</sup>/Å<sup>2</sup>/s की अति-निम्न खुराक दर के साथ एकत्र किया गया था। 3 स्फटिक से आंकड़ा विलय किया गया था<ref name="Shi e01345">{{Cite journal |last=Shi |first=Dan |last2=Nannenga |first2=Brent L |last3=Iadanza |first3=Matthew G |last4=Gonen |first4=Tamir |date=2013-11-19 |title=प्रोटीन माइक्रोक्रिस्टल की त्रि-आयामी इलेक्ट्रॉन क्रिस्टलोग्राफी|url=https://elifesciences.org/articles/01345 |journal=eLife |language=en |volume=2 |pages=e01345 |doi=10.7554/eLife.01345 |issn=2050-084X}}</ref> अच्छे शोधन आँकड़ों के साथ 2.9Å विश्लेषण संरचना प्राप्त करने के लिए, और पहली बार प्रतिनिधित्व किया<ref name="Shi e01345"/> परिशीतन स्थितियों में 3डी सूक्षमस्फटिक से खुराक के प्रति संवेदनशील प्रोटीन की संरचना का निर्धारण करने के लिए इलेक्ट्रॉन विवर्तन का सफलतापूर्वक उपयोग किया गया था।
-==== निरंतर चरण रोटेशन ====
+==== निरंतर चरण क्रमावर्तन ====
-डेटा संग्रह योजना के दौरान निरंतर रोटेशन लागू करके सिद्धांत पेपर के सबूत के तुरंत बाद माइक्रोईडी में सुधार किया गया था।<ref name=":1" />यहां क्रिस्टल को धीरे-धीरे एक ही दिशा में घुमाया जाता है जबकि विवर्तन को तेज कैमरे पर मूवी के रूप में रिकॉर्ड किया जाता है। कार्यप्रणाली एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफी में रोटेशन विधि की तरह है। इससे डेटा गुणवत्ता में कई सुधार हुए और मानक एक्स-रे क्रिस्टलोग्राफिक सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके डेटा प्रोसेसिंग की अनुमति मिली।<ref name=":1" />निरंतर रोटेशन के लाभों में माइक्रोईडी में गतिशील बिखरने में कमी शामिल है<ref>{{Cite journal |last=Nannenga |first=Brent L |last2=Shi |first2=Dan |last3=Leslie |first3=Andrew G W |last4=Gonen |first4=Tamir |date=September 2014 |title=माइक्रोईडी में निरंतर-रोटेशन डेटा संग्रह द्वारा उच्च-रिज़ॉल्यूशन संरचना निर्धारण|url=http://www.nature.com/articles/nmeth.3043 |journal=Nature Methods |language=en |volume=11 |issue=9 |pages=927–930 |doi=10.1038/nmeth.3043 |issn=1548-7091 |pmc=4149488 |pmid=25086503}}</ref> और पारस्परिक स्थान का बेहतर नमूनाकरण। 2014 से निरंतर-रोटेशन माइक्रोईडी डेटा संग्रह का मानक तरीका है।
+आंकड़े संग्रह योजना के दौरान निरंतर क्रमावर्तन लागू करके घटक पत्र के प्रमाण के तुरंत बाद सूक्ष्मईडी में सुधार किया गया था।<ref name=":1" /> यहां स्फटिक को धीरे-धीरे एक ही दिशा में घुमाया जाता है जबकि विवर्तन को तीव्र कैमरे पर चलचित्र के रूप में अभिलेखबद्ध किया जाता है। कार्यप्रणाली एक्स-रे स्फटिकी में क्रमावर्तन विधि की तरह है। इससे आंकड़े गुणवत्ता में कई सुधार हुए और मानक एक्स-रे क्रिस्टलिकी सॉफ़्टवेयर का उपयोग करके आंकड़े प्रसंस्करण की अनुमति मिली।<ref name=":1" />निरंतर क्रमावर्तन के लाभों में सूक्ष्मईडी में गतिशील प्रकीर्णन में कमी <ref>{{Cite journal |last=Nannenga |first=Brent L |last2=Shi |first2=Dan |last3=Leslie |first3=Andrew G W |last4=Gonen |first4=Tamir |date=September 2014 |title=माइक्रोईडी में निरंतर-रोटेशन डेटा संग्रह द्वारा उच्च-रिज़ॉल्यूशन संरचना निर्धारण|url=http://www.nature.com/articles/nmeth.3043 |journal=Nature Methods |language=en |volume=11 |issue=9 |pages=927–930 |doi=10.1038/nmeth.3043 |issn=1548-7091 |pmc=4149488 |pmid=25086503}}</ref> और पारस्परिक स्थान का बेहतर प्रतिचयन सम्मिलित है। 2014 से निरंतर-क्रमावर्तन सूक्ष्मईडी आंकड़े संग्रह का मानक तरीका है।
-=== डाटा प्रोसेसिंग ===
+=== आंकड़ा संसाधन ===
-माइक्रोईडी डाटा प्रोसेसिंग के लिए विस्तृत प्रोटोकॉल प्रकाशित किए गए हैं।<ref name=":2" />  जब निरंतर चरण रोटेशन का उपयोग करके माइक्रोईडी डेटा एकत्र किया जाता है, तो मानक :श्रेणी:क्रिस्टलोग्राफी सॉफ्टवेयर<रेफरी नाम= नन्नेंगा 369–379 /> का उपयोग किया जा सकता है।
+सूक्ष्मईडी आंकड़ा संसाधन के लिए विस्तृत विज्ञप्ति प्रकाशित किए गए हैं।<ref name=":2" />  जब निरंतर चरण क्रमावर्तन का उपयोग करके सूक्ष्मईडी आंकड़े एकत्र किया जाता है, तो मानक :श्रेणी: स्फटिकी सॉफ्टवेयर का उपयोग किया जा सकता है।
-== माइक्रोईडी और अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों के बीच अंतर ==
+== सूक्ष्मईडी और अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों के बीच अंतर ==
 {{POV section|date=February 2023}}
-अकार्बनिक लवण जैसे विकिरण असंवेदनशील सामग्री के भौतिक विज्ञान के लिए विकसित अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों में स्वचालित विवर्तन टोमोग्राफी (ADT) शामिल हैं।<ref name=":5">{{Cite journal|last1=Mugnaioli|first1=E.|last2=Gorelik|first2=T.|last3=Kolb|first3=U.|date=2009|title=स्वचालित विवर्तन टोमोग्राफी और प्रीसेशन तकनीक के संयोजन द्वारा प्राप्त इलेक्ट्रॉन विवर्तन डेटा से "एब इनिटियो" संरचना समाधान|journal=Ultramicroscopy|volume=109|issue=6|pages=758–765|doi=10.1016/j.ultramic.2009.01.011|issn=0304-3991|pmid=19269095}}</ref> और रोटेशन इलेक्ट्रॉन विवर्तन (लाल<ref name=":6">{{Cite journal|last1=Wan|first1=Wei|last2=Sun|first2=Junliang|last3=Su|first3=Jie|last4=Hovmöller|first4=Sven|last5=Zou|first5=Xiaodong|date=2013-11-15|title=Three-dimensional rotation electron diffraction: softwareREDfor automated data collection and data processing|journal=Journal of Applied Crystallography|volume=46|issue=6|pages=1863–1873|doi=10.1107/s0021889813027714|issn=0021-8898|pmc=3831301|pmid=24282334}}</ref>). ये विधियां माइक्रोईडी से काफी भिन्न हैं: एडीटी में [[गोनियोमीटर]] झुकाव के असतत चरणों का उपयोग अंतराल को भरने के लिए बीम पुरस्सरण के संयोजन में पारस्परिक स्थान को कवर करने के लिए किया जाता है।<ref name=":5" />ADT क्रिस्टल ट्रैकिंग के लिए प्रीसेशन और स्कैनिंग ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के लिए विशेष हार्डवेयर का उपयोग करता है।<ref name=":5" />रेड टीईएम में किया जाता है लेकिन गोनियोमीटर असतत चरणों में मोटे तौर पर झुका हुआ होता है और अंतराल को भरने के लिए बीम टिल्टिंग का उपयोग किया जाता है।<ref name=":6" />ADT और RED डेटा को प्रोसेस करने के लिए विशेष सॉफ़्टवेयर का उपयोग किया जाता है।<ref name=":6" />महत्वपूर्ण रूप से, ADT और RED को विकिरण असंवेदनशील अकार्बनिक सामग्री और लवणों पर विकसित और परीक्षण किया गया था और जमे हुए हाइड्रेटेड अवस्था में अध्ययन किए गए प्रोटीन या विकिरण संवेदनशील कार्बनिक पदार्थों के साथ उपयोग के लिए प्रदर्शित नहीं किया गया है।
+अकार्बनिक लवण जैसे विकिरण असंवेदनशील सामग्री के भौतिक विज्ञान के लिए विकसित अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों में स्वचालित विवर्तन टोमोग्राफी (ADT) <ref name=":5">{{Cite journal|last1=Mugnaioli|first1=E.|last2=Gorelik|first2=T.|last3=Kolb|first3=U.|date=2009|title=स्वचालित विवर्तन टोमोग्राफी और प्रीसेशन तकनीक के संयोजन द्वारा प्राप्त इलेक्ट्रॉन विवर्तन डेटा से "एब इनिटियो" संरचना समाधान|journal=Ultramicroscopy|volume=109|issue=6|pages=758–765|doi=10.1016/j.ultramic.2009.01.011|issn=0304-3991|pmid=19269095}}</ref> और क्रमावर्तन इलेक्ट्रॉन विवर्तन (लाल<ref name=":6">{{Cite journal|last1=Wan|first1=Wei|last2=Sun|first2=Junliang|last3=Su|first3=Jie|last4=Hovmöller|first4=Sven|last5=Zou|first5=Xiaodong|date=2013-11-15|title=Three-dimensional rotation electron diffraction: softwareREDfor automated data collection and data processing|journal=Journal of Applied Crystallography|volume=46|issue=6|pages=1863–1873|doi=10.1107/s0021889813027714|issn=0021-8898|pmc=3831301|pmid=24282334}}</ref>) सम्मिलित हैं। ये विधियां सूक्ष्मईडी से काफी भिन्न हैं: एडीटी में [[गोनियोमीटर|कोणमापी]] झुकाव के असतत चरणों का उपयोग अंतराल को भरने के लिए किरण पुरस्सरण के संयोजन में पारस्परिक स्थान को आच्छादित करने के लिए किया जाता है।<ref name=":5" /> ADT स्फटिक अनुसरण के लिए अग्रगमन और   ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी रेखाचित्रण के लिए विशेष हार्डवेयर का उपयोग करता है।<ref name=":5" /> आरईडी टीईएम में किया जाता है लेकिन कोणमापी असतत चरणों में स्थूलतः झुका हुआ होता है और अंतराल को भरने के लिए किरणपुंज अभिनमन का उपयोग किया जाता है।<ref name=":6" /> ADT और RED आंकड़े को संसाधित करने के लिए विशेष सॉफ़्टवेयर का उपयोग किया जाता है।<ref name=":6" /> महत्वपूर्ण रूप से, ADT और RED को विकिरण असंवेदनशील अकार्बनिक सामग्री और लवणों पर विकसित और परीक्षण किया गया था और जमे हुए जलयोजित अवस्था में अध्ययन किए गए प्रोटीन या विकिरण संवेदनशील कार्बनिक पदार्थों के साथ उपयोग के लिए प्रदर्शित नहीं किया गया है।
 == मील के पत्थर ==
-=== विधि गुंजाइश ===
+=== प्रणाली विस्तार ===
-बड़े गोलाकार प्रोटीन की संरचनाओं को निर्धारित करने के लिए माइक्रोईडी का उपयोग किया गया है,<ref>{{Cite journal|last1=Nannenga|first1=Brent L|last2=Shi|first2=Dan|last3=Hattne|first3=Johan|last4=Reyes|first4=Francis E|last5=Gonen|first5=Tamir|date=2014-10-10|title=माइक्रोईडी द्वारा निर्धारित उत्प्रेरित की संरचना|journal=eLife|volume=3|pages=e03600|doi=10.7554/elife.03600|issn=2050-084X|pmc=4359365|pmid=25303172}}</ref> छोटे प्रोटीन,<ref name=":1" />पेप्टाइड्स,<ref name=":3" />झिल्ली प्रोटीन,<ref name=":7">{{Cite journal|last1=Liu|first1=S.|last2=Gonen|first2=T.|date=2018-09-12|title=NaK आयन चैनल की माइक्रोएड संरचना चयनात्मकता फिल्टर में Na+ विभाजन की एक प्रक्रिया को प्रकट करती है|doi=10.2210/pdb6cpv/pdb|s2cid=240183721 }}</ref> कार्बनिक अणु,<ref name=":4">{{Cite journal|last1=Gallagher-Jones|first1=Marcus|last2=Glynn|first2=Calina|last3=Boyer|first3=David R.|last4=Martynowycz|first4=Michael W.|last5=Hernandez|first5=Evelyn|last6=Miao|first6=Jennifer|last7=Zee|first7=Chih-Te|last8=Novikova|first8=Irina V.|last9=Goldschmidt|first9=Lukasz|date=2018-01-15|title=Sub-ångström cryo-EM structure of a prion protofibril reveals a polar clasp|journal=Nature Structural & Molecular Biology|volume=25|issue=2|pages=131–134|doi=10.1038/s41594-017-0018-0|issn=1545-9993|pmc=6170007|pmid=29335561}}</ref><ref>{{Cite journal|last1=Jones|first1=Christopher|last2=Martynowycz|first2=M|last3=Hattne|first3=Johan|last4=Fulton|first4=Tyler J.|last5=Stoltz|first5=Brian M.|last6=Rodriguez|first6=Jose A.|last7=Nelson|first7=Hosea|last8=Gonen|first8=Tamir|date=2018|title=छोटे अणु संरचना निर्धारण के लिए एक शक्तिशाली उपकरण के रूप में क्रायोईएम विधि माइक्रोईडी|journal=ACS Central Science |volume=4 |issue=11 |pages=1587–1592 |url=https://authors.library.caltech.edu/90583/2/acscentsci.8b00760.pdf|language=en-US|doi=10.26434/chemrxiv.7215332.v1|pmid=30555912 |pmc=6276044}}</ref> और अकार्बनिक यौगिक।<ref>{{Cite journal|last1=Vergara|first1=Sandra|last2=Lukes|first2=Dylan A.|last3=Martynowycz|first3=Michael W.|last4=Santiago|first4=Ulises|last5=Plascencia-Villa|first5=Germán|last6=Weiss|first6=Simon C.|last7=de la Cruz|first7=M. Jason|last8=Black|first8=David M.|last9=Alvarez|first9=Marcos M.|date=2017-10-31|title=MicroED Structure of Au146(p-MBA)57 at Subatomic Resolution Reveals a Twinned FCC Cluster|journal=The Journal of Physical Chemistry Letters|volume=8|issue=22|pages=5523–5530|doi=10.1021/acs.jpclett.7b02621|issn=1948-7185|pmc=5769702|pmid=29072840}}</ref> इनमें से कई उदाहरणों में हाइड्रोजन और आवेशित आयन देखे गए।<ref name=":3" /><ref name=":7" />
+बड़े गोलाकार प्रोटीन की संरचनाओं को निर्धारित करने के लिए सूक्ष्मईडी का उपयोग किया गया है,<ref>{{Cite journal|last1=Nannenga|first1=Brent L|last2=Shi|first2=Dan|last3=Hattne|first3=Johan|last4=Reyes|first4=Francis E|last5=Gonen|first5=Tamir|date=2014-10-10|title=माइक्रोईडी द्वारा निर्धारित उत्प्रेरित की संरचना|journal=eLife|volume=3|pages=e03600|doi=10.7554/elife.03600|issn=2050-084X|pmc=4359365|pmid=25303172}}</ref> छोटे प्रोटीन,<ref name=":1" /> पेप्टाइड,<ref name=":3" /> झिल्ली प्रोटीन,<ref name=":7">{{Cite journal|last1=Liu|first1=S.|last2=Gonen|first2=T.|date=2018-09-12|title=NaK आयन चैनल की माइक्रोएड संरचना चयनात्मकता फिल्टर में Na+ विभाजन की एक प्रक्रिया को प्रकट करती है|doi=10.2210/pdb6cpv/pdb|s2cid=240183721 }}</ref> कार्बनिक अणु,<ref name=":4">{{Cite journal|last1=Gallagher-Jones|first1=Marcus|last2=Glynn|first2=Calina|last3=Boyer|first3=David R.|last4=Martynowycz|first4=Michael W.|last5=Hernandez|first5=Evelyn|last6=Miao|first6=Jennifer|last7=Zee|first7=Chih-Te|last8=Novikova|first8=Irina V.|last9=Goldschmidt|first9=Lukasz|date=2018-01-15|title=Sub-ångström cryo-EM structure of a prion protofibril reveals a polar clasp|journal=Nature Structural & Molecular Biology|volume=25|issue=2|pages=131–134|doi=10.1038/s41594-017-0018-0|issn=1545-9993|pmc=6170007|pmid=29335561}}</ref><ref>{{Cite journal|last1=Jones|first1=Christopher|last2=Martynowycz|first2=M|last3=Hattne|first3=Johan|last4=Fulton|first4=Tyler J.|last5=Stoltz|first5=Brian M.|last6=Rodriguez|first6=Jose A.|last7=Nelson|first7=Hosea|last8=Gonen|first8=Tamir|date=2018|title=छोटे अणु संरचना निर्धारण के लिए एक शक्तिशाली उपकरण के रूप में क्रायोईएम विधि माइक्रोईडी|journal=ACS Central Science |volume=4 |issue=11 |pages=1587–1592 |url=https://authors.library.caltech.edu/90583/2/acscentsci.8b00760.pdf|language=en-US|doi=10.26434/chemrxiv.7215332.v1|pmid=30555912 |pmc=6276044}}</ref> और अकार्बनिक यौगिक।<ref>{{Cite journal|last1=Vergara|first1=Sandra|last2=Lukes|first2=Dylan A.|last3=Martynowycz|first3=Michael W.|last4=Santiago|first4=Ulises|last5=Plascencia-Villa|first5=Germán|last6=Weiss|first6=Simon C.|last7=de la Cruz|first7=M. Jason|last8=Black|first8=David M.|last9=Alvarez|first9=Marcos M.|date=2017-10-31|title=MicroED Structure of Au146(p-MBA)57 at Subatomic Resolution Reveals a Twinned FCC Cluster|journal=The Journal of Physical Chemistry Letters|volume=8|issue=22|pages=5523–5530|doi=10.1021/acs.jpclett.7b02621|issn=1948-7185|pmc=5769702|pmid=29072840}}</ref> इनमें से कई उदाहरणों में हाइड्रोजन और आवेशित आयन देखे गए।<ref name=":3" /><ref name=":7" />
 ===पार्किंसंस रोग के α-सिन्यूक्लिन की नवीन संरचना ===
-माइक्रोईडी द्वारा हल की गई पहली उपन्यास संरचनाएं 2015 के अंत में प्रकाशित हुई थीं।<ref name=":3">{{Cite journal|title=MicroED structure of the segment, GVVHGVTTVA, from the A53T familial mutant of Parkinson's disease protein, alpha-synuclein residues 47-56|last1=Rodriguez|first1=J.A.|last2=Ivanova|first2=M.|date=2015-09-09|last3=Sawaya|first3=M.R.|last4=Cascio|first4=D.|last5=Reyes|first5=F.|last6=Shi|first6=D.|last7=Johnson|first7=L.|last8=Guenther|first8=E.|last9=Sangwan|first9=S.|doi=10.2210/pdb4znn/pdb}}</ref> ये संरचनाएं पेप्टाइड अंशों की थीं जो पार्किंसंस रोग के लिए जिम्मेदार प्रोटीन अल्फा-सिंक्यूक्लिन|α-सिंक्युलिन के विषाक्त कोर का निर्माण करती हैं और एकत्रीकरण तंत्र विषाक्त समुच्चय में अंतर्दृष्टि का नेतृत्व करती हैं। संरचनाओं को 1.4 Å रिज़ॉल्यूशन पर हल किया गया था।
+सूक्ष्मईडी द्वारा हल की गई पहली उपन्यास संरचनाएं 2015 के अंत में प्रकाशित हुई थीं।<ref name=":3">{{Cite journal|title=MicroED structure of the segment, GVVHGVTTVA, from the A53T familial mutant of Parkinson's disease protein, alpha-synuclein residues 47-56|last1=Rodriguez|first1=J.A.|last2=Ivanova|first2=M.|date=2015-09-09|last3=Sawaya|first3=M.R.|last4=Cascio|first4=D.|last5=Reyes|first5=F.|last6=Shi|first6=D.|last7=Johnson|first7=L.|last8=Guenther|first8=E.|last9=Sangwan|first9=S.|doi=10.2210/pdb4znn/pdb}}</ref> ये संरचनाएं पेप्टाइड अंशों की थीं जो पार्किंसंस रोग के लिए उत्तरदायी प्रोटीन α-सिंक्युलिन के विषाक्त अंतर्भाग का निर्माण करती हैं और एकत्रीकरण तंत्र विषाक्त समुच्चय में अंतर्दृष्टि का नेतृत्व करती हैं। संरचनाओं को 1.4 Å विश्लेषण पर हल किया गया था।
-=== R2lox === की नई प्रोटीन संरचना
-MicroED द्वारा हल की गई प्रोटीन की पहली उपन्यास संरचना 2019 में प्रकाशित हुई थी।<ref>{{cite journal |last1=Xu |first1=Hongyi |last2=Lebrette |first2=Hugo |last3=Clabbers |first3=Max T. B. |last4=Zhao |first4=Jingjing |last5=Griese |first5=Julia J. |last6=Zou |first6=Xiaodong |last7=Högbom |first7=Martin |title=Solving a new R2lox protein structure by microcrystal electron diffraction |journal=Science Advances |date=7 August 2019 |volume=5 |issue=8 |pages=eaax4621 |doi=10.1126/sciadv.aax4621|pmid=31457106 |pmc=6685719 |doi-access=free }}</ref> प्रोटीन सल्फ़ोलोबस एसिडोकैल्डेरियस से मेटालोएंजाइम आर2-लाइक लिगैंड-बाइंडिंग ऑक्सीडेज (आर2लोक्स) है। ज्ञात संरचना के साथ निकटतम होमोलॉग से निर्मित 35% अनुक्रम पहचान के मॉडल का उपयोग करके आणविक प्रतिस्थापन द्वारा संरचना को 3.0 Å रिज़ॉल्यूशन पर हल किया गया था। इस काम ने प्रदर्शित किया कि प्रोटीन की अज्ञात संरचना प्राप्त करने के लिए माइक्रोईडी का उपयोग किया जा सकता है।
+==== R2lox की नई प्रोटीन संरचना ====
+सूक्ष्मईडी द्वारा हल की गई प्रोटीन की पहली उपन्यास संरचना 2019 में प्रकाशित हुई थी।<ref>{{cite journal |last1=Xu |first1=Hongyi |last2=Lebrette |first2=Hugo |last3=Clabbers |first3=Max T. B. |last4=Zhao |first4=Jingjing |last5=Griese |first5=Julia J. |last6=Zou |first6=Xiaodong |last7=Högbom |first7=Martin |title=Solving a new R2lox protein structure by microcrystal electron diffraction |journal=Science Advances |date=7 August 2019 |volume=5 |issue=8 |pages=eaax4621 |doi=10.1126/sciadv.aax4621|pmid=31457106 |pmc=6685719 |doi-access=free }}</ref> प्रोटीन सल्फ़ोलोबस एसिडोकैल्डेरियस से धातुएन्ज़ाइम आर2-प्रकार संलग्नी-बाध्यकारी ऑक्सीडेज (आर2लोक्स) है। ज्ञात संरचना के साथ निकटतम होमोलॉग से निर्मित 35% अनुक्रम पहचान के प्रतिरूप का उपयोग करके आणविक प्रतिस्थापन द्वारा संरचना को 3.0 Å विश्लेषण पर हल किया गया था। इस काम ने प्रदर्शित किया कि प्रोटीन की अज्ञात संरचना प्राप्त करने के लिए सूक्ष्मईडी का उपयोग किया जा सकता है।
-== माइक्रोएड शिक्षा और सेवाओं तक पहुंच ==
+== सूक्ष्मईडी शिक्षा और सेवाओं तक पहुंच ==
-MicroED के बारे में अधिक जानने के लिए, कोई वार्षिक [https://cryoem.ucla.edu/course MicroED Imaging Center Course at UCLA] या [https://www.diamond.ac.uk/Instruments/Biological-Cryo] में भाग ले सकता है। -इमेजिंग/ईबीआईसी/ट्रेनिंग/कोर्स-टाइटल-पीजी/माइक्रो-एड-कोर्स.एचटीएमएल डायमंड लाइट सोर्स पर माइक्रोईडी कोर्स]। क्रायोजेनिक इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी विधियों से संबंधित आगामी बैठकों और कार्यशालाओं के बारे में अधिक जानकारी के लिए, कृपया [https://www.emdataresource.org/3dem_events.html 3DEM बैठकें और कार्यशालाएं पृष्ठ] देखें।
+सूक्ष्मईडी के बारे में अधिक जानने के लिए, कोई वार्षिक [https://cryoem.ucla.edu/course सूक्ष्मईडी यूसीएलए में प्रतिबिंबन केंद्र पाठ्यक्रम] या [https://www.diamond.ac.uk/Instruments/Biological-Cryo] में भाग ले सकता है। परिशीतन इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शिकी विधियों से संबंधित आगामी बैठकों और कार्यशालाओं के बारे में अधिक जानकारी के लिए, कृपया [https://www.emdataresource.org/3dem_events.html 3DEM बैठकें और कार्यशालाएं पृष्ठ] देखें।
-कई विश्वविद्यालय और कंपनियां माइक्रोईडी सेवाएं प्रदान करती हैं, जिनमें [https://cryoem.ucla.edu/medic MEDIC - UCLA में माइक्रोक्रिस्टल इलेक्ट्रॉन डिफ्रैक्शन इमेजिंग सेंटर] और [https://www.nanoimagingservices.com/services/microed-services नैनोइमेजिंग शामिल हैं सेवाएं]।
+कई विश्वविद्यालय और कंपनियां सूक्ष्मईडी सेवाएं प्रदान करती हैं, जिनमें [https://cryoem.ucla.edu/medic एमईडीआईसी - यूसीएलए में सूक्षमस्फटिक इलेक्ट्रॉन विवर्तन प्रतिबिंबन केंद्र] और नैनोप्रतिबिंबन सेवाएं सम्मिलित हैं ।
-कई इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप सिस्टम माइक्रोएड डेटा रिकॉर्ड करने में सक्षम हैं जिनमें जेईओएल द्वारा विकसित डेटा शामिल हैं; और थर्मो फिशर/एफईआई।
+कई इलेक्ट्रॉन सूक्ष्मदर्शी प्रणाली सूक्ष्मएड आंकड़े अभिलेखबद्ध करने में सक्षम हैं जिनमें जेईओएल और थर्मो फिशर/एफईआई द्वारा विकसित आंकड़े सम्मिलित हैं।
 == संदर्भ ==

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Revision as of 12:36, 13 April 2023

Contents

विकास

प्रायोगिक व्यवस्थापन

यंत्र विन्यास

सूक्ष्मदर्शी

संसूचक

आंकड़े संग्रह

अभी भी विसरण

निरंतर चरण क्रमावर्तन

आंकड़ा संसाधन

सूक्ष्मईडी और अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों के बीच अंतर

मील के पत्थर

प्रणाली विस्तार

पार्किंसंस रोग के α-सिन्यूक्लिन की नवीन संरचना

R2lox की नई प्रोटीन संरचना

सूक्ष्मईडी शिक्षा और सेवाओं तक पहुंच

संदर्भ

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माइक्रोक्रिस्टल इलेक्ट्रॉन विवर्तन: Difference between revisions

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यंत्र विन्यास

सूक्ष्मदर्शी

संसूचक

आंकड़े संग्रह

अभी भी विसरण

निरंतर चरण क्रमावर्तन

आंकड़ा संसाधन

सूक्ष्मईडी और अन्य इलेक्ट्रॉन विवर्तन विधियों के बीच अंतर

मील के पत्थर

प्रणाली विस्तार

पार्किंसंस रोग के α-सिन्यूक्लिन की नवीन संरचना

R2lox की नई प्रोटीन संरचना

सूक्ष्मईडी शिक्षा और सेवाओं तक पहुंच

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