सूक्ष्मजीवविज्ञानी संवर्धन
एक सूक्ष्मजीवविज्ञानी संस्कृति, या कीटाणु-विज्ञान संस्कृति, सूक्ष्मजीवों को नियंत्रित प्रयोगशाला स्थितियों के तहत पूर्व निर्धारित संस्कृति मीडिया में पुन: उत्पन्न करने की एक विधि है। माइक्रोबियल संस्कृति आणविक जीव विज्ञान में एक शोध उपकरण के रूप में उपयोग की जाने वाली मूलभूत और बुनियादी नैदानिक पद्धतियां हैं।
'संस्कृति' शब्द भी उगाए जा रहे सूक्ष्मजीवों को संदर्भित कर सकता है।
माइक्रोबियल संस्कृतियों का उपयोग जीव के प्रकार, परीक्षण किए जा रहे नमूने में इसकी बहुतायत, या दोनों को निर्धारित करने के लिए किया जाता है। यह सूक्ष्म जीव विज्ञान के प्राथमिक नैदानिक तरीकों में से एक है और एजेंट को पूर्व निर्धारित माध्यम में गुणा करके संक्रामक बीमारी के कारण को निर्धारित करने के लिए एक उपकरण के रूप में उपयोग किया जाता है। उदाहरण के लिए, गले के पिछले हिस्से में ऊतक के अस्तर को खुरच कर और हानिकारक सूक्ष्मजीवों, जैसे कि 'स्ट्रेप्टोकोकस प्योगेनेस', स्ट्रेप के प्रेरक एजेंट के लिए स्क्रीन करने में सक्षम होने के लिए नमूने को ब्लॉट करके एक गले की संस्कृति ली जाती है। गला।[1] इसके अलावा, संस्कृति शब्द का प्रयोग आम तौर पर अनौपचारिक रूप से प्रयोगशाला में एक विशिष्ट प्रकार के सूक्ष्मजीव को चुनिंदा रूप से विकसित करने के लिए किया जाता है।
सूक्ष्मजीवों की शुद्ध संस्कृति को अलग करना अक्सर आवश्यक होता है। एक शुद्ध (या अक्षीय) संस्कृति अन्य प्रजातियों या प्रकारों की अनुपस्थिति में बढ़ने वाले सेल (जीव विज्ञान) या बहुकोशिकीय जीवों की आबादी है। एक शुद्ध संस्कृति एक एकल कोशिका या एक जीव से उत्पन्न हो सकती है, इस मामले में कोशिकाएँ एक दूसरे के आनुवंशिक क्लोन (कोशिका जीव विज्ञान) हैं। माइक्रोबियल कल्चर को गेलिंग करने के लिए एग्रोज जेल (अगर) के माध्यम का उपयोग किया जाता है। आगर एक जिलेटिनस पदार्थ है जो समुद्री शैवाल से प्राप्त होता है। अगर का एक सस्ता विकल्प ग्वार गम है, जिसका उपयोग थर्मोफाइल के अलगाव और रखरखाव के लिए किया जा सकता है।
बैक्टीरियल कल्चर
कई प्रकार के बैक्टीरियल कल्चर तरीके हैं जिनका चयन एजेंट के सुसंस्कृत होने और डाउनस्ट्रीम उपयोग के आधार पर किया जाता है।
शोरबा संस्कृतियों
बैक्टीरियल कल्चर की एक विधि लिक्विड कल्चर है, जिसमें वांछित बैक्टीरिया को तरल पोषक तत्व माध्यम में निलंबित कर दिया जाता है, जैसे लुरिया शोरबा , एक सीधे फ्लास्क में। यह एक वैज्ञानिक को विभिन्न डाउनस्ट्रीम अनुप्रयोगों के लिए बड़ी मात्रा में बैक्टीरिया विकसित करने की अनुमति देता है।
तरल कल्चर एक रोगाणुरोधी परख की तैयारी के लिए आदर्श होते हैं जिसमें तरल शोरबा बैक्टीरिया के साथ टीका लगाया जाता है और रात भर बढ़ने दिया जाता है (एक समान विकास को प्रोत्साहित करने के लिए यांत्रिक रूप से शोरबा को मिलाने के लिए 'शेकर' का उपयोग किया जा सकता है)। इसके बाद, एक विशिष्ट दवा या प्रोटीन (रोगाणुरोधी पेप्टाइड्स) की रोगाणुरोधी गतिविधि के परीक्षण के लिए नमूने के विभाज्य लिया जाता है।
एक विकल्प के रूप में स्थिर तरल संस्कृतियों का उपयोग किया जा सकता है। इन संस्कृतियों को हिलाया नहीं जाता है, और वे सूक्ष्म जीवों को ऑक्सीजन प्रवणता प्रदान करते हैं।[2]
आगर प्लेटें
माइक्रोबायोलॉजिकल संस्कृतियों को अलग-अलग आकार के पेट्री डिश में उगाया जा सकता है, जिसमें अगर-आधारित विकास माध्यम की पतली परत होती है। एक बार पेट्री डिश में विकास माध्यम वांछित जीवाणुओं के साथ टीका लगाया जाता है, तो प्लेटों को चयनित जीवाणुओं के बढ़ने के लिए इष्टतम तापमान पर ऊष्मायन किया जाता है (उदाहरण के लिए, आमतौर पर 37 डिग्री सेल्सियस, या मानव शरीर के तापमान पर, मनुष्यों से संस्कृतियों के लिए या जानवर, या पर्यावरण संस्कृतियों के लिए कम)। विकास के वांछित स्तर को प्राप्त करने के बाद, भविष्य के प्रयोगों के लिए जीवाणुओं को रखने के लिए एक विस्तृत अवधि के लिए अगर प्लेटों को रेफ्रिजरेटर में उल्टा रखा जा सकता है।
अगर प्लेट में डालने और जमने की अनुमति देने से पहले आगर प्लेट # प्रकार की एक किस्म है जिसे अगर में जोड़ा जा सकता है। कुछ प्रकार के जीवाणु केवल कुछ योजकों की उपस्थिति में ही विकसित हो सकते हैं। इसका उपयोग बैक्टीरिया के इंजीनियर्ड स्ट्रेन बनाते समय भी किया जा सकता है जिसमें एंटीमाइक्रोबियल प्रतिरोध#बैक्टीरिया|एंटीबायोटिक-प्रतिरोध जीन होता है। जब चयनित एंटीबायोटिक को अगर में जोड़ा जाता है, तो प्रतिरोध प्रदान करने वाले जीन डालने वाले जीवाणु कोशिकाएं ही बढ़ने में सक्षम होंगी। यह शोधकर्ता को केवल उन कालोनियों का चयन करने की अनुमति देता है जो सफलतापूर्वक रूपांतरित हो गए थे।
आगर आधारित डिपस्टिक्स
डिपस्टिक प्रारूपों के लिए लागू की गई अगर प्लेटों का लघु संस्करण, उदाहरण के लिए। डुबकी स्लाइड, डिजिटल डिपस्टिक [3] निदान उद्देश्यों के लिए देखभाल के बिंदु पर उपयोग की जाने वाली क्षमता दिखाएं। अगर प्लेटों पर उनके फायदे हैं क्योंकि वे लागत प्रभावी हैं और उनके संचालन के लिए विशेषज्ञता या प्रयोगशाला वातावरण की आवश्यकता नहीं होती है, जो उन्हें देखभाल के बिंदु पर उपयोग करने में सक्षम बनाता है।
छुरा संस्कृतियों
छुरा संस्कृतियाँ अगर प्लेटों के समान हैं, लेकिन एक परखनली में ठोस अगर द्वारा बनाई जाती हैं। बैक्टीरिया को एक टीका सुई या एक पिपेट टिप के माध्यम से अगर के केंद्र में छुरा घोंपा जाता है। पंचर वाले हिस्से में बैक्टीरिया पनपते हैं।[4] छुरा संस्कृतियों का सबसे अधिक उपयोग अल्पकालिक भंडारण या संस्कृतियों के शिपमेंट के लिए किया जाता है।
संस्कृति संग्रह
माइक्रोबियल कल्चर संग्रह जीवाणु वर्गीकरण में अनुसंधान के लिए मानक संदर्भ सूक्ष्मजीवों, सेल लाइनों और अन्य सामग्रियों की व्यवहार्य संस्कृतियों के अधिग्रहण, प्रमाणीकरण, उत्पादन, संरक्षण, सूचीकरण और वितरण पर ध्यान केंद्रित करते हैं।[5][6] संस्कृति संग्रह भी तनाव (जीव विज्ञान) के भंडार हैं।
| Collection Acronym | Name | Location |
|---|---|---|
| ATCC | American Type Culture Collection | Manassas, Virginia |
| BCCM | Belgian Co-ordinated Collections of Micro-organisms | Decentralized, Coordination Cell in Brussels, Belgium |
| CCUG | Culture Collection University of Gothenburg | Gothenburg, Sweden |
| CECT | Colección Española de Cultivos Tipo | Valencia, Spain |
| CIP | Collection d'Institut Pasteur | Paris, France |
| DSMZ | Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen | Braunschweig, Germany |
| ICMP | International Collection of Microorganisms from Plants | Auckland, New Zealand |
| JCM | Japan Collection of Microorganisms | Tsukuba, Ibaraki, Japan |
| NCTC | National Collection of Type Cultures | Public Health England, London, United Kingdom |
| NCIMB | National Collection of Industrial, Food and Marine Bacteria | Aberdeen, Scotland |
थर्मोफिलिक सूक्ष्मजीवों की ठोस प्लेट संस्कृति
50 से 70 डिग्री सेल्सियस के तापमान पर बढ़ने वाले थर्मोफिलिक सूक्ष्मजीवों जैसे बैसिलस एसिडोकैल्डेरियस, बैसिलस स्टीरोथर्मोफिलस, थर्मस एक्वाटिकस और थर्मस थर्मोफिलस आदि की ठोस प्लेट संस्कृतियों के लिए, कम एसाइल स्पष्ट गेलन गम अगर के लिए अगर की तुलना में पसंदीदा गेलिंग एजेंट साबित हुआ है। उपरोक्त थर्मोफिलिक बैक्टीरिया की गिनती या अलगाव या दोनों।[7]
वायरल कल्चर
वाइरस और फेज संस्कृतियों को मेजबान कोशिकाओं की आवश्यकता होती है जिसमें वायरस या फेज गुणा हो जाते हैं। बैक्टीरियोफेज के लिए, जीवाणु कोशिकाओं को संक्रमित करके संस्कृतियां उगाई जाती हैं। इसके बाद फेज को एक प्लेट पर बैक्टीरिया के लॉन में परिणामी सजीले टुकड़े से अलग किया जा सकता है। वायरल संस्कृतियों को उनके उपयुक्त यूकेरियोटिक मेजबान कोशिकाओं से प्राप्त किया जाता है। स्ट्रीक प्लेट विधि माइक्रोबियल आबादी को भौतिक रूप से अलग करने का एक तरीका है, और ठोस अगर प्लेट पर एक इनॉक्यूलेटिंग लूप के साथ आगे और पीछे इनोक्युलेट फैलाकर किया जाता है। इनक्यूबेटर (संस्कृति) पर, कॉलोनियां उत्पन्न होंगी और बायोमास से एकल कोशिकाओं को अलग किया गया होगा। एक बार एक सूक्ष्मजीव को शुद्ध संस्कृति में अलग कर दिया गया है, इसे आगे के अध्ययन और संस्कृतियों में उपयोग के लिए एक व्यवहार्य स्थिति में संरक्षित करना आवश्यक है जिसे स्टॉक संस्कृति कहा जाता है। इन संस्कृतियों को बनाए रखना होगा, ताकि उनके जैविक, प्रतिरक्षात्मक और सांस्कृतिक चरित्रों का कोई नुकसान न हो।
यूकेरियोटिक सेल कल्चर
शुद्ध संस्कृतियों का अलगाव
एकल-कोशिका वाले यूकेरियोट्स के लिए, जैसे कि खमीर, शुद्ध संस्कृतियों का अलगाव बैक्टीरिया संस्कृतियों के लिए समान तकनीकों का उपयोग करता है। बहुकोशिकीय जीवों की शुद्ध संस्कृतियों को अक्सर एक संस्कृति शुरू करने के लिए केवल एक व्यक्ति को चुनकर आसानी से अलग किया जाता है। उदाहरण के लिए, कवक, बहुकोशिकीय शैवाल और छोटे मेटाज़ोआ की शुद्ध संस्कृति के लिए यह एक उपयोगी तकनीक है।
प्रश्न में नमूने के अवलोकन के लिए शुद्ध संस्कृति तकनीकों का विकास महत्वपूर्ण है। अलग-अलग कोशिकाओं को अलग करने और एक शुद्ध संस्कृति का उत्पादन करने के लिए सबसे आम तरीका एक स्ट्रीक प्लेट तैयार करना है। स्ट्रीक प्लेट विधि माइक्रोबियल आबादी को भौतिक रूप से अलग करने का एक तरीका है, और ठोस अगर प्लेट पर एक इनोक्युलेटिंग लूप के साथ आगे और पीछे इनोक्युलेट फैलाकर किया जाता है। ऊष्मायन पर, कॉलोनियां उत्पन्न होंगी और बायोमास से एकल कोशिकाओं को अलग कर दिया जाएगा। एक बार एक सूक्ष्मजीव को शुद्ध संस्कृति में अलग कर दिया गया है, इसे आगे के अध्ययन और उपयोग के लिए व्यवहार्य अवस्था में संरक्षित करना आवश्यक है। स्टॉक संस्कृतियों को बनाए रखना होगा, ताकि उनके जैविक, प्रतिरक्षात्मक और सांस्कृतिक चरित्रों का कोई नुकसान न हो।
यह भी देखें
- कॉलोनी बनाने की इकाई
- रक्त संस्कृति
- माइक्रोबियल डार्क मैटर
- माइक्रोबियल फूड कल्चर
- स्क्रीनिंग संस्कृतियों
- थूक संस्कृति
- तुल्यकालिक संस्कृति
- गेलन गम
संदर्भ
- ↑ Healthwise, Incorporated (2010-06-28). "Throat Culture". WebMD. Archived from the original on 2013-03-17. Retrieved 2013-03-10.
- ↑ Old, D.C.; Duguid, J.P. (1970). "स्थैतिक तरल माध्यम में फिम्ब्रिएट बैक्टीरिया का चयनात्मक परिणाम". Journal of Bacteriology. American Society for Microbiology. 103 (2): 447–456. doi:10.1128/JB.103.2.447-456.1970. PMC 248102. PMID 4914569.
- ↑ Iseri, Emre; Biggel, Michael; Goossens, Herman; Moons, Pieter; van der Wijngaart, Wouter (2020). "Digital dipstick: miniaturized bacteria detection and digital quantification for the point-of-care". Lab on a Chip. 20 (23): 4349–4356. doi:10.1039/D0LC00793E. ISSN 1473-0197. PMID 33169747.
- ↑ "Addgene: Streaking a Plate from an Addgene Stab Culture". www.addgene.org. Archived from the original on 8 April 2018. Retrieved 21 March 2018.
- ↑ 5.0 5.1 Madigan, Michael T. (2012). Brock biology of microorganisms (13th ed.). San Francisco: Benjamin Cummings. ISBN 9780321649638.
- ↑ 6.0 6.1 Uruburu, F. (2003). "संस्कृति संग्रह का इतिहास और सेवाएं" (PDF). International Microbiology. 6 (2): 101–103. doi:10.1007/s10123-003-0115-2. hdl:10550/12955. PMID 12811589. S2CID 19711069.
- ↑ Lin, Chi Chung and Casida, L. E. (1984) GELRITE as a Gelling Agent in Media for the Growth of Thermophilic Microorganisms. Applied and Environmental Microbiology 47, 427-429.
बाहरी संबंध
- EFFCA - European Food and Feed Cultutes Association. Information about production and uses of microbial cultures as well as legislative aspects.
